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勇于突破,科研为青光眼患者带来新福音

时间:2018-01-08 12:05来源:未知 作者:河南报盟网 点击:

 

  王峰教授团队在三氧化二砷抑制小梁切除术后成纤维细胞增殖的影响取得突破

 

 

  青光眼在世界范围内是主要致盲眼病,对视力的损害严重且不可逆,使早期诊断和治疗显得尤为重要。目前,青光眼滤过性手术仍是减少患者眼内压最有效的治疗方法,然而,结膜和结膜下眼球筋膜因成纤维细胞增殖相关联的瘢痕化致使滤过功能逐渐衰竭,最终结局为术后眼压控制不良,继而青光眼进展导致视力进一步受损乃至盲。这青光眼术后滤过泡瘢痕化的过程中,成纤维细胞起着关键性作用。所以,如何抑制成纤维细胞术后增殖成为了青光眼术后一样只要治疗目标。丝裂霉素C(MMC)和5-氟尿嘧啶(5-FU)等现在被广泛应用到实验与临床当中。但这些药物在提高手术的成功率的同时,对邻近组织具有很多的毒副作用而导致很多并发症。因此,寻找替代性药物和新抗瘢痕方法是很必要的,以尽量减少眼部并发症,提高手术成功率。

 

  王峰教授团队从体外实验和体内实验两方面来探究三氧化二砷通过上调p27的表达对兔小梁切除术后成纤维细胞增殖的影响。在体外细胞实验中,进行了兔Tennon’s囊成纤维细胞的原代培养及鉴定,在满足细胞条件后进行了药物刺激,然后进行MTT及Western Blot检测工作。MTT结果显示三氧化二砷刺激后,除空白对照组外的成纤维细胞增殖随着药物作用的时间及浓度的增加都受到了抑制,且抑制作用随浓度及时间增加而增强;p27属于细胞抑制性周期蛋白家族,它对细胞增殖的调控起重要作用,p27在细胞周期G0期呈现高表达状态,但随着细胞进入G1期,其表达量迅速下降。在细胞在G0到G1的转换过程中快速去除p27会发现细胞转为S期,当p27处于低表达状态时,细胞表现出高增殖和细胞迁徙,而抑制性细胞周期蛋白在细胞核内的堆积会使细胞处于休眠静止状态,Western Blot结果显示三氧化二砷可以调控p27的表达,在72h内随着药物作用时间延长,p27表达呈上调趋势,p27在瘢痕增殖形成阶段低表达,表明p27与瘢痕组织增殖过程中起主导作用的成纤维细胞增其呈负相关。在本次实验中,首次阐述在三氧化砷作用下,青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化主要相关成纤维细胞在细胞周期蛋白表达的改变,证实滤过泡瘢痕过程中p27低表达,而在三氧化二砷过程中,其通过诱导抑制细胞周期蛋白p27高表达达到抑制成纤维细胞增殖,提高手术效果。同时也说明了PCNA与瘢痕组织增殖过程中起主导作用的成纤维细胞增其呈正相关。在体内实验中,动物模型灌注后去术区行冰冻切片HE染色,对切片在细胞计数器上进行成纤维细胞计数,结果显示三氧化二砷作用眼相对于对照组,结膜下瘢痕组织和总细胞数减少,对照组结膜下滤过囊的大小小于用药组,术区呈现瘢痕化状态;而三氧化二砷用药组尽管术区仍能见到少量纤维组织增生,但在活体模型中可见明显高于对照组的隆起滤过泡。三氧化二砷药物作用组中在应用6μmol/L浓度药物时均未发现明显的眼内炎症反应。

 

  青光眼术后瘢痕化是一个长期存在的问题,这种瘢痕化的创口愈合是导致手术失败的主要原因。调节伤口愈合过程中成纤维细胞过度增生和瘢痕形成在提高手术成功率方面起了很大的作用。创口愈合是一个复杂过程,包括炎症因子相互级联、迁移和外渗,血管新生,成纤维细胞增殖,细胞外基质的沉积和瘢痕形成。抗细胞增殖治疗可通过抑制成纤维细胞DNA和RNA合成、细胞分裂、蛋白质合成等,在青光手手术中用作防止滤过泡瘢痕化的辅助治疗。临床上最常见的是青光眼术区应用MMC或5-Fu,然而MMC或5-Fu的应该用往往伴有严重的并发症,如:角膜上皮缺损、手术创口渗漏,持续性低眼压伴视力减退。因此王教授团队探讨的该方向可以明确阐述三氧化二砷对青光眼术后抗术区瘢痕化作用,从而为提高青光眼手术成功率提供新的药物指导,同时也期待该方法可以应用于临床,为青光眼患者带来新的福音。

 

  近几年,王峰教授带领其团队勇于开拓,开展Ex-PRESS引流器手术、东北三省首例CLASS青光眼手术以及采用个性化手术治疗多例先天性青光眼患儿等多项高难度手术,年手术量千例以上。作为中华眼科专业委员会青光眼学组委员、中国眼科医师协会青光眼学组委员,在完成繁忙的临床工作同时,发表SCI收录文章13篇,包括在国际顶级期刊IOVS发表多篇文章,在中华眼科杂志发表东北地区首篇青光眼方面的综述,主持国家自然科学基金面上项目、教育部留学归国基金等多个项目,撰写的文章曾获世界华人眼科大会优秀论文奖等,担任美国期刊IJOES国际编委。

 

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